新型冠狀病毒肆虐，核酸檢測試劑盒的研制和廣泛使用，對于病例的確診起到了重要作用。不過有臨床醫(yī)生發(fā)現(xiàn)，試劑檢測會出現(xiàn)“假陰性”和“假陽性”，如天津某新型冠狀病毒肺炎病例先后進行了4次核酸檢測，前3次均為陰性，直到第4次檢測才呈陽性。雖屬于小概率事件，但為什么會出現(xiàn)類似“漏檢”情況？
“漏檢”情況的出現(xiàn)可能由多種因素導(dǎo)致，中國計量院前沿中心主任、研究員戴新華告訴記者，“可能是樣本的收集、處理運輸和保存不當(dāng)，也可能是新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒質(zhì)量問題，還有一種可能就是核心儀器的性能和運轉(zhuǎn)狀態(tài)不佳”。
“假陰性”“假陽性”從何而來？
2月5日，國家衛(wèi)健委發(fā)布《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》，根據(jù)該方案，目前病例確診共有熒光定量RT-PCR檢測和基因測序兩種方法。其中實時熒光RT-PCR檢測因其時間短、成本低等特點，已成為目前應(yīng)用比較廣泛的新冠病毒確診的方法。
實時熒光定量RT-PCR檢測病毒的原理，簡單來說，就是將從病人呼吸道樣本或血液樣本中提取到的核酸和試劑配比好，隨后放到實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)分析儀(PCR儀)中，進行PCR反應(yīng)，通過溫度的升降，病人樣本中的新冠病毒核酸會被特異性的引物探針識別，從而進行快速復(fù)制，使其熒光信號倍增，儀器檢測到熒光信號的變化，并以擴增曲線形式呈現(xiàn)，以此來最終確診病人樣本中是否含有新冠病毒。
“病例確診，除了試劑盒，還離不開檢測設(shè)備，”戴新華說，“參數(shù)準(zhǔn)確性能可靠的PCR儀，加上質(zhì)量可靠的核酸檢測試劑盒，兩者相互配合才能確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?！比绻糜诓《竞怂釞z測的核心儀器PCR儀存在問題，如溫度控制不準(zhǔn)確、溫度均勻性差別太大、熒光光路系統(tǒng)異常、熒光染料污染等情況，就會出現(xiàn)“假陰性”或“假陽性”結(jié)果，從而導(dǎo)致“漏檢”。
病毒檢測的關(guān)鍵設(shè)備
作為病毒檢測的核心關(guān)鍵設(shè)備，PCR儀的工作狀態(tài)如何，將直接影響病毒檢測的效率和準(zhǔn)確度, 因此，對PCR儀的校準(zhǔn)尤為重要。為此，早在2015年，由中國計量院主導(dǎo)完成的《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》就已發(fā)布實施。該規(guī)范第一起草人、中國計量院前沿中心副研究員高運華介紹說，該規(guī)范在國家層面上規(guī)定了PCR儀計量校準(zhǔn)的技術(shù)流程和性能指標(biāo)，計量性能指標(biāo)包括：溫度示值誤差、溫度均勻度、平均升溫速率、平均降溫速率、樣本示值誤差、樣本線性等6個指標(biāo)。
在該規(guī)范和中國計量院相關(guān)專家指導(dǎo)下，上海、浙江、江蘇、遼寧、云南、四川、河北等近10個省市的計量技術(shù)機構(gòu)先后建立了計量標(biāo)準(zhǔn)，開展相關(guān)PCR儀的校準(zhǔn)工作。與此同時，中國計量院建立了相對完善的PCR儀校準(zhǔn)能力，配備了各種類型的標(biāo)準(zhǔn)器，適用于16孔、24孔、32孔、48孔、96孔、384孔等不同控溫模塊PCR儀的性能校準(zhǔn)，還研制了定量PCR儀校準(zhǔn)用國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠
此次疫情爆發(fā)后，全國各地醫(yī)療機構(gòu)PCR儀檢測需求激增，各地計量技術(shù)機構(gòu)夜以繼日地為所在省市的疾病預(yù)防控制中心、定點醫(yī)院的PCR儀進行計量校準(zhǔn)服務(wù)，保障新型冠狀病毒檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。而在他們工作的背后，中國計量院為其提供量值溯源、咨詢和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等支撐服務(wù)。截至2月5日，已累計為南京市計量院等全國各級計量技術(shù)機構(gòu)提供了44套PCR儀器校準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)服務(wù)，有效保障了地方計量技術(shù)機構(gòu)PCR儀校準(zhǔn)結(jié)果的溯源性和可靠性。
由于全國已實現(xiàn)建標(biāo)、能夠完成熒光定量PCR儀校準(zhǔn)的計量機構(gòu)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足校準(zhǔn)需求,因此,除了支撐保障地方計量技術(shù)機構(gòu)外，中國計量院前沿中心生命科學(xué)計量團隊還直接奔赴各大醫(yī)院、疾控中心、核酸檢測試劑盒生產(chǎn)廠家，為其開展PCR儀的計量校準(zhǔn)服務(wù)。疫情爆發(fā)以來,已為解放軍總醫(yī)院、軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院、中國疾病預(yù)防控制中心病毒所、阜外醫(yī)院、中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院、廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院等醫(yī)療機構(gòu)的多臺PCR儀進行計量校準(zhǔn)服務(wù)?！拔覀兊墓ぷ骶褪且_保用于新型冠狀病毒核酸檢測的PCR儀工作狀態(tài)良好，出具的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠?！备哌\華說。
